Coriell Institute細(xì)胞促進(jìn)神經(jīng)元的生長(zhǎng)
發(fā)布日期:2020-11-25 點(diǎn)擊:1456
Coriell Institute細(xì)胞是無(wú)菌的、液體培養(yǎng)基,包含必需和非必需氨基、維生素、有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物、激素、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì),該培養(yǎng)基含碳酸氫鹽緩沖體系,在5%二氧化碳/95%空氣培養(yǎng)箱中平衡時(shí)PH值為7.4。
培養(yǎng)基在數(shù)量上和質(zhì)量上都保證理想的營(yíng)養(yǎng)平衡狀態(tài),選擇性促進(jìn)體外正常人類神經(jīng)元的生長(zhǎng)。血清中含有的組分,例如血清蛋白,可作為代謝毒物清除劑使用并能聚集于培養(yǎng)基中。當(dāng)缺乏這些成分時(shí),如神經(jīng)元在無(wú)血清培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),特別容易為過(guò)氧化物及自由基傷害,這已被許多研究者注意到了。過(guò)氧化物酶以及超氧化物歧化酶可阻止培養(yǎng)基中過(guò)氧化物和超氧化物的累積,可以促進(jìn)低密度培養(yǎng)細(xì)胞的存活。
Coriell Institute細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。